在蛋白互作研究中，一个关键问题是：如何把蛋白之间是否发生相互作用，转化为可以直接观察的实验结果？

酵母双杂交（Y2H）正是利用报告基因完成这一过程。

在典型的GAL4型酵母双杂交体系中，研究人员将待研究的两个蛋白分别与DNA结合结构域和转录激活结构域融合表达。当两个目标蛋白发生相互作用时，两个功能结构域在空间上重新接近，从而使下游报告基因被激活。

对于采用MEL1报告系统的酵母双杂交实验而言，MEL1基因被激活后，可以表达α-D-半乳糖苷酶。

这时，培养基中的X-α-Gal就发挥作用了。

当α-D-半乳糖苷酶识别并水解X-α-Gal后，会释放具有显色能力的吲哚类中间体，该中间体进一步发生氧化反应并形成不溶性的蓝色产物。

因此，实验中看到的"蓝色菌落"，并不是蛋白互作本身直接产生的颜色，而是经过了一次完整的报告信号转换：

蛋白互作 → MEL1报告基因激活 → α-D-半乳糖苷酶活性产生 → X-α-Gal水解 → 蓝色显色产物形成

最终，原本无法直接观察的蛋白互作相关事件，就通过菌落颜色呈现出来，为研究人员筛选和判读阳性克隆提供了直观依据。

在酵母双杂交蓝白斑筛选中，研究人员最终看到的是一个个蓝色菌落，这是报告基因激活后产生的α-D-半乳糖苷酶，与X-α-Gal发生反应所形成的显色结果。

那么，X-α-Gal究竟是如何把看不见的酶活"变成"蓝色的？

X-α-Gal是一种经典的α-D-半乳糖苷酶显色底物。它将可显色的吲哚基团与α-D-半乳糖通过糖苷键连接起来，使显色基团在底物状态下保持"隐藏"，只有当α-D-半乳糖苷酶识别并水解底物后，才会释放出来并进一步形成蓝色显色产物。

以酵母双杂交中的蓝白斑筛选为例，这一过程可以概括为三个步骤：

1. 底物识别：X-α-Gal中的α-D-半乳糖苷结构被α-D-半乳糖苷酶识别，酶与底物结合并进入催化过程。

2. 酶促水解：α-D-半乳糖苷酶水解X-α-Gal中的α-D-糖苷键，释放吲哚基团相关的显色中间体。

3. 氧化显色：释放出的吲哚类显色中间体在空气中发生氧化二聚，形成水不溶性的蓝色显色产物。

因此，在MEL1型酵母双杂交体系中，蛋白互作所触发的报告信号，最终会通过α-D-半乳糖苷酶对X-α-Gal的显色反应呈现为蓝色菌落，使原本无法直接观察的分子事件获得直观的颜色读出。

而从底物本身的显色机制来看，X-α-Gal并不局限于酵母双杂交体系。只要检测体系中存在可作用于X-α-Gal的α-D-半乳糖苷酶，就可以利用其酶促水解与后续显色反应，将酶活转化为可观察的蓝色信号。

中文名：5-溴-4-氯-3-吲哚基-α-D-吡喃半乳糖苷

英文名：5-Bromo-4-chloro-3-indolyl α-D-galactopyranoside

简  称：X-α-Gal

CAS号：107021-38-5

分子式：C14H15BrClNO6

分子量：408.63

规  格：1 g / 25 g / 100 g（支持定制包装）

形  态：冻干粉

货  号：G01010004

信  号：蓝色

在酵母双杂交筛选中，X-α-Gal常与X-β-Gal——LacZ报告基因的显色底物配套使用。金赛途同步供应：

• CAS: 7240-90-6, X-β-Gal

X-α-Gal提供了经典的蓝色显色方案，但针对不同检测体系和配方设计需求，α-D-半乳糖苷酶底物并不只有这一种选择。

金赛途生物通过高纯度工艺控制，推出了涵盖显色、荧光及比色等多种信号类型，能够满足不同检测体系开发需求的系列化底物：

1. CAS: 198402-61-8, Salmon-α-Gal

2. CAS: 198402-60-7, Magenta-α-Gal

3. CAS: 1226578-88-6, Blue-α-Gal

4. CAS: 1226579-02-7, Rouge-α-Gal

5. CAS: 134931-83-2, Green-α-Gal

6. CAS: 2484873-05-2, Aldol 518-α-Gal

7. CAS: 7493-95-0, PNP-α-Gal

8. CAS: 38597-12-5, 4MU-α-Gal

9. CAS: 25997-59-5, Br-Nap-α-D-Gal

10. CAS: 19887-85-5, ONP-α-Gal

11. CAS: 65174-63-2, 1-Naphthyl-α-Gal

12. CAS: 1175532-13-4, Res-α-Gal

作为经典的α-D-半乳糖苷酶底物，X-α-Gal不仅能够满足科研实验中的显色需求，也可用于微生物检测相关体系开发。具体应用场景如下：

1. 酵母双杂交蓝白斑筛选

用于酵母双杂交实验中阳性克隆的蓝白斑筛选和结果判读。

2. 微生物显色培养基开发与菌种鉴别

作为微生物显色培养基开发中的酶底物原料，利用不同菌株α-D-半乳糖苷酶活性差异实现菌落显色鉴别。

主要覆盖：

• 肠球菌属的筛选与鉴定

肠球菌属大多高表达α-D-半乳糖苷酶，可利用X-α-Gal进行靶向筛查。

• 显色培养基配方开发

支持单指标检测及多指标、多颜色（蓝/鲑鱼红/品红）显色体系的配方开发。

3. 水质监测与食品安全检测

用于饮用水、地表水及娱乐水体中粪便污染指示菌的监测，以及乳制品、肉类等食品样本中相关微生物的酶活筛查。

在科研实验与体外诊断相关产品开发中，原料的稳定性与供应链安全是影响最终产品品质的关键因素之一。金赛途凭借成熟的合成质控工艺，为检测试剂开发提供可靠的底物选择：

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α-D-半乳糖苷酶系列显色底物在行业及学术界积累了大量成熟的研究和文献基础，便于技术人员直接参考，快速建立和优化配方体系。

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金赛途产出的底物水解后释放的有色沉淀稳定，颜色浓郁，不溶于水，能够有效避免菌落颜色"晕染"或扩散，保障菌落定位的清晰度与结果判读的准确性。

✅ 多种显色体系，支持差异化开发

覆盖蓝色、鲑鱼红、品红/紫红等多种显色体系，满足不同目标菌及多指标检测需求，为显色培养基配方优化提供灵活的底物选择。

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相比高昂且交期不稳定的进口品牌，金赛途提供极具竞争力的价格，且生产工艺严苛，批间稳定性优异，支持规模化产品开发与稳定供应。

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